必考点29 基因工程和细胞工程
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依纲排查
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1.基因工程的诞生(Ⅰ)
基因工程的理论基础是什么？
2．基因工程的原理、技术及应用(Ⅱ)
(1)基因工程的操作工具是什么？有哪些特点？
(2)基因工程操作的“四步曲”分别是什么？
(3)基因工程在农业、医学等方面有哪些应用？
3．蛋白质工程(Ⅰ)
(1)蛋白质工程操作的基本原理和设计思路是什么？
(2)蛋白质工程和基因工程的关系是什么？
4．植物组织培养(Ⅱ)
(1)植物组织培养的基本原理和一般操作流程是怎样的？
(2)植物组织培养有哪些应用？
5．动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)
(1)动物细胞培养的基本操作过程和条件分别是什么？
(2)体细胞克隆的操作流程及应用是什么？
6．细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)
(1)单克隆抗体制备的操作流程是怎样的？
(2)单克隆抗体的特点是什么？有哪些应用？
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1．理清基因工程3种操作工具的作用与特点
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限制酶
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DNA连接酶
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载体
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作用
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切割目的基因和载体
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拼接DNA片段，形成重组DNA分子
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携带目的基因进入受体细胞
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作用
部位
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两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键
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作用特
点(条件)
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(1)识别特定的核苷酸序列；
(2)在特定位点上切割DNA分子
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(1)E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端；
(2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端
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(1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；
(2)有一个至多个限制酶切割位点；
(3)具有特殊的标记基因
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2.掌握获取目的基因的3种途径
(1)直接分离：从自然界已有的物种中分离，如从________________中获取。
(2)人工合成目的基因(常用方法如下)
①化学合成法：已知核苷酸序列的________基因，直接利用________________用化学方法合成，不需要模板。
②人工合成法：以______为模板，在________________作用下人工合成。
